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  • 免疫组织化学染色代表HP作为阴性HP的代表的阴性
  • 日期:2019-05-02   点击:   作者:365bet体育平台   来源:365bet平台注册
答案
病情分析:免疫组织化学是应用免疫学的基本原理:抗原 - 抗体反应,即抗原 - 抗体特异性结合的原理,导致标记试剂发色的化学试剂(荧光素,酶,组织细胞中的抗原)开发颜色以确定肽和蛋白质,定位它们,表征和量化它们建议:(1)石蜡切片在水中脱蜡。
(2)在室温下孵育3%H 2 O 2 5至10分钟以除去内源性过氧化物酶活性。
(3)用蒸馏水冲洗并在PBS中浸泡5分钟×2分钟(如果需要抗原修复,可在此步骤后进行)。
(4)将5-10%的正常山羊血清(在PBS中稀释),在室温下孵育10分钟,并倾析血清并且不洗涤。
逐滴加入一抗的工作溶液,并在37℃下孵育1-2小时或在4℃下孵育过夜。
(5),用PBS冲洗5次,每次3分钟。
(6)加入适量的生物素标记的二抗的工作溶液,并在37℃下孵育10至30分钟。
(7)用PBS洗涤5分钟×3次。
(8)加入适量的碱性磷酸酶标记的辣根酶或链霉抗生物素蛋白工作溶液,在37℃下孵育10至30分钟。
(9)用PBS洗涤5分钟×3次。
(10),成色前3到15分钟(DAB或NBT / BCIP)
(11),自来水完全冲洗,不透明,脱水,清澈密封。
2015-12-0411:43:41
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